氨丁三醇緩沖液pH范圍及配制方法詳解

一、Tris緩沖液pH范圍

Tris緩沖液在生物化學研究中使用較廣泛的一種緩沖劑，它的常用有效pH范圍是在“中性”范圍，如：

Tris緩沖液：pH=7.5~9

Tris-HCl緩沖液：pH＝7.5~8.5

Tris-磷酸鹽緩沖液：pH＝5.0~9.0

二、Tris緩沖液的配制方法

1.某一特定pH值的0.05mol/L Tris緩沖液的配制：將50ml 0.1mol/L Tris堿溶液與下表所示相應(yīng)體積（單位：ml）的0.1ml/L HCl混合，加水將體積調(diào)至100ml。

2.Tris-HCl緩沖液的兩種配置方法

第一種方法是分別配制0.05 mol/L Tris和0.05 mol/L HCl溶液，然后按常用表中所列體積混合即可。

但是由于標準濃度的稀鹽酸不易配制，所以常用另一種方法：以配置1 L 0.1 mol/L的Tris-HCl緩沖液為例：先稱12.11 g Tris堿溶于950 mL～970 mL 去離子水中，邊攪拌邊滴加4 N HCl，用pH計測定溶液pH值至所需的pH值，然后再加水補足到1 L。

三、其他Tris衍生緩沖液

除了Tris-HCl之外，Tris還有多種衍生緩沖液：

TBS=Tris-HCl+ NaCl+KCl，常用于清洗免疫染色的組織或Western Blotting中的蛋白印跡膜等；

TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20，做Western Blotting中常用的一種洗膜緩沖液；

TE=Tris-HCl+EDTA，對DNA的堿基有保護性，常被用于DNA的穩(wěn)定和儲存；

TAE=Tris base+乙酸+EDTA，是大片段DNA短時間電泳時廣泛使用的緩沖系統(tǒng)；

TBE=Trisbase+硼酸+EDTA，適用于長時間DNA電泳，對較小片段分離效果較好。

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